一、原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法定量檢測(cè)樣品中克倫特羅的殘留量。
二、適用范圍
定量檢測(cè)動(dòng)物組織、飼料、尿液、血清樣品中克倫特羅藥物的殘留。
三、試劑盒特點(diǎn)及技術(shù)指標(biāo)
 * 檢 測(cè) 時(shí) 間 ： 30 min
  試劑盒靈敏度： 0.1 ppb(µg/kg)
 * 試劑盒檢測(cè)純陰性樣本的背景值＜0.2 ppb
 * 尿液樣品直接點(diǎn)板，假陽(yáng)性率≤1 %
   試劑盒檢測(cè)樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度： 四、所需材料
儀器：微孔板酶標(biāo)儀450 nm/630 nm、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管（10 mL）、天平（感量0.01 g）、離心管（5 mL, 50 mL）
微量移液器：?jiǎn)蔚?nbsp;1 µL～10 µL、10 µL～100 µL
多道 50 µL～300 µL
試劑：甲醇、濃鹽酸、氫氧化鈉、去離子水。
五、 試劑盒組成
*注：6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為：0 ppb, 0.1 ppb, 0.3 ppb,
0.9 ppb, 2.7 ppb, 8.1 ppb，直接使用。
六、 酶標(biāo)免疫測(cè)定程序
①     將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，待其完全回  升至室溫（20～25℃）后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
②  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
③  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50 µL
到對(duì)應(yīng)的微孔中，加入克倫特羅酶標(biāo)物50 µL /孔，再加入克倫特羅抗體50 µL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20 min。
④  洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，
加入洗滌工作液250 µL/孔，每次靜置20 s，甩去孔內(nèi)液體，重復(fù)洗滌3次，最后一次用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
⑤  顯色：加入底物液A液50 µL/孔，再加底物   
液B液50 µL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10 min，最后一次用吸水紙拍干。
⑥     測(cè)定：加入終止液50 µL/孔，用酶標(biāo)儀立即  測(cè)定450 nm處的吸光度值（建議用雙波長(zhǎng)450/630 nm）檢測(cè)。
七、 結(jié)果判定
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ppb）的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中克倫特羅實(shí)際濃度。（詳見試劑盒專業(yè)分析軟件，以便進(jìn)行大量樣本的分析計(jì)算。）
八、 注意事項(xiàng)
① 洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
② 反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
③ 不使用過了有效期的試劑盒，不交換使用不同批號(hào)的試劑。
④ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630 nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時(shí)間為15～20 min即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到30 min，反之則減短反應(yīng)時(shí)間。
九、貯藏條件及保存期
貯藏條件： 2～8℃
保 質(zhì) 期： 12個(gè)月